一、試劑純度與質量方面
1,試劑的純度會對培養物生長與實驗結果造成直接影響,舉例來說,培養基中如酵母提取物、蛋白胨等營養成分需要達到生物試劑級,
防止雜質對微生物代謝造成干擾,或者導致細胞毒性等。如果操作人員使用分析純或者化學純試劑,也可能因有機物、重金屬等雜質,
對培養物活性產生一定影響。
2.實驗用試劑必須全部經過嚴格的滅菌處理,方法一般包括過濾除菌、高壓蒸汽滅菌等,這主要是為了防止引入支原體或雜菌等污染物。
舉例來說,如細胞因子、血清等生物制劑需要通過0.22μm 濾膜進行過濾處理,且培養基需要在 121℃的高壓下滅菌 20 分鐘。
3.為了確保試劑質量,實驗用試劑還需要附帶合格證書,并通過空白對照實驗進行驗證。舉例來說,新批次的培養基需要先進行無菌測
試,在確認無污染后才能投入使用。
二、試劑兼容與穩定方面
1.試劑需要確保和培養箱環境兼容,比如試劑pH值就需要和培養條件相匹配。舉例來說,哺乳動物的細胞培養一般會要求pH值為7.2至
7.4,選用碳酸氫鈉緩沖液維持,防止因培養箱內二氧化碳濃度的波動引起pH劇烈變化。另外,部分如抗體、酶等試劑有著對溫度敏感
的特點,操作人員需要注意防止直接暴露于培養箱高溫環境,正確做法應在分裝后于冷藏區密封存放,實驗需要使用時再臨時加入。
2.試劑在生化培養箱的溫度與濕度條件下需要保持穩定,舉例來說,如氨芐青霉素等抗生素在高溫下容易出現降解的問題,操作人員需
要現配現用或者分裝冷存,在使用時再加入培養基。
三、試劑安全與環保方面
1.如臨床樣本、病毒培養液等試劑因為涉及病原微生物,需要在生物安全柜中進行操作,防止發生泄漏對培養箱造成污染。另外,為了
避免交叉感染,培養箱內部需要定期使用如含氯消毒劑等專用消毒劑或者75%乙醇進行擦拭。部分如甲醛、二甲亞砜DMSO等有毒試劑,
操作人員在使用時需要佩戴好防護手套和護目鏡,防止揮發氣體可能對培養物與操作人員造成的危害。
2.廢棄試劑需要按照危險廢物的分類進行處理,尤其是一些含有放射性物質、重金屬的試劑,嚴禁直接排入下水道危害環境。如含疊氮
鈉的緩沖液還需要使用專用容器收集,然后交由專業機構進行處理。
四、試劑存儲與使用方面
1.試劑在存儲時需要嚴格遵照標簽要求,比如干擾素等試劑需要低溫保存,應單獨存放在4℃冰箱;光敏染料、維生素等試劑需要避光,
應選用棕色瓶存放在培養箱暗倉。
2.試劑在進入生化培養箱前,其外包裝應用75%乙醇進行擦拭,防止外部污染帶入箱內。在操作時,需要使用無菌吸管或者移液器,防
止交叉污染。另外,試劑開啟后應盡快使用,防止因長時間暴露在空氣中可能導致的成分揮發或者污染等問題。
五、試劑管理與記錄方面
1.試劑需要做好管理工作,標注名稱、濃度、配制日期、保質期以及責任人等信息,并定期檢查清理過期試劑。
2.在使用試劑時,需要記錄好批號、用量、實驗日期等信息,以便結果異常或者出現污染時和追溯原因。
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